酶聯(lián)免疫試劑盒（Elisa）是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定，易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，目前已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
試劑盒操作看似簡(jiǎn)便，但要做到十分卻也是個(gè)技術(shù)活。它對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作的環(huán)境以及操作人員的操作的熟練程度有著較高的要求。由于大部分的試驗(yàn)操作步驟都是由實(shí)驗(yàn)人員來(lái)完成的，人為的誤差相對(duì)嚴(yán)重一些。再此本人結(jié)合了自己的工作實(shí)踐向大家分享一下酶聯(lián)免疫試劑盒操作時(shí)的注意事項(xiàng)。
?實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要干凈，防止空氣中的一些細(xì)菌或粉塵對(duì)實(shí)驗(yàn)造成干擾。?一般的酶聯(lián)免疫試劑盒中的酶標(biāo)抗體是以辣根過(guò)氧化物酶（HRP）進(jìn)行標(biāo)記
的。因此要求樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)镹aN3是HRP的抑制劑。?如果樣本是血清，應(yīng)該充分離心，不得有顆粒。
?試劑盒應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用。不同批次的試劑盒中的溶液不得混用。?在進(jìn)行酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)之前，應(yīng)該將試劑盒放置室溫平衡30min以上。?稀釋溶液時(shí)，應(yīng)按照說(shuō)明書的要求進(jìn)行稀釋。盡量選用去離子水或雙蒸
水進(jìn)行稀釋。
?要正確使用移液器，吸取液體要，槍頭上不得留有氣泡。吸取不同的液
體時(shí)，要注意更換槍頭。
?加樣時(shí)要懸臂加樣，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸。
?建議所有的樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。?孵育時(shí)需將微孔用封板膜或保鮮膜封好，防止水分的蒸發(fā)。且封板膜不得重
復(fù)使用。
洗板時(shí)，要注意防止孔間的交叉污染。
?由于底物顯色劑對(duì)光較敏感，因此進(jìn)行顯色時(shí)，應(yīng)注意避光。
?底物顯色劑為TMB，應(yīng)避免與皮膚接觸。終止液為2M濃硫酸，具有腐蝕
性，應(yīng)避免與皮膚接觸。
?酶標(biāo)儀使用前，應(yīng)先預(yù)熱30min。讀取結(jié)果前，輕輕震蕩，使溶液均一。讀
數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)擦干酶標(biāo)板底部，且孔內(nèi)不能有氣泡。
?酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。